细胞重新铺在纤连 Aug 14, 2023 11:30:51 GMT Quote Select PostDeselect PostLink to PostMemberGive GiftBack to Top Post by alamin4471 on Aug 14, 2023 11:30:51 GMT 突变 c.6913–1 G > A;这种突变导致成熟转录本中的核苷酸缺失,并且阅读框发生变化,导致终止密码子过早出现。 hiPSC-EPI分化 Rovina 等人先前描述了细胞重编程为 iPSC 系。[ M 视黄酸 (Sigma Aldrich, R2625) 处理细胞。第 6 天用 BPEL + 30 ng/ml BMP4 + 1 µM 视黄酸更换培养基。3 天后,将蛋白包被的板上,其中含有补充有 20 mM SB 431542(R&D Systems,161)的 BPEL 培养基。 hiPSC-fibs 分化 EPI-iPSC 细胞接种于玻连蛋白 (ThermoFisher, A14700) 包被的 6 孔板中,并含有补充有 20 µg/ml FGF-2 (Peprotech, AF-100-18B) 的 C级执行名单BPEL 培养基。每两天更换一次培养基,持续 10 天。第 10 天,培养基更换为 FGM3(Promocell,C-39350)并每隔一天更换一次。在第 0 代和第 3 代之间使用细胞。通过将 iPSC 来源的心脏成纤维细胞与 10 ng/ml TGF beta 或 100 ng/ml 血管紧张素 II 在含有 0.5% SVF 的 FGM3 中孵育 24 小时,进行促纤维化刺激。 RNA测序和生物信息学 使用 ReliaPrep RNA 细胞小量制备系统 (Promega) 分离 RNA。在片段分析仪(高级分析)上评估样品的数量和质量。使用 TruSeq 人类转录数据库 [ 17 ] ])。 其余分